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較早公告: SK-OV-3細胞ATCC菌種準備培養基;北美胎牛血清,10%;雙抗1%2培養條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%3凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。液氮儲存可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式:1干冰運輸,收到后立即轉入液氮凍存或直接復蘇;2存活細胞,收到后應繼續生長,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存上海滬震實業有限公司是一家集研發、生產和銷售于一體的生命科學實驗室產品,廠房嚴格按照GMP標準設計建造,擁有的生產設備和檢測儀器
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BC-3細胞ATCC菌種

BC-3細胞ATCC菌種

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BC-3細胞ATCC菌種準備培養基;北美胎牛血清,10%;雙抗1%
2培養條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%
3凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。液氮儲存
可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式:1干冰運輸,收到后立即轉入液氮凍存或直接復蘇;2存活細胞,收到后應繼續生長,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存

BC-3細胞ATCC菌種的詳細資料:



BC-3細胞ATCC菌種以10%FBS+1640或F12培養,0.25%胰酶消化。塑料瓶或玻璃瓶都可以,當然,前者效果較好。復蘇時用塑料瓶。5-7天傳一次(1:2),2-3天換一次液。盡量高密度傳,因為PC-3細胞喜歡扎堆長,如果過了兩三天細胞長得不均勻,可以消化離心一下。

生長狀態:懸浮生長
運輸方式:凍存運輸
ATCC Number:CRL-2277™
相關疾?。?/td>淋巴瘤
年限:85 years
數量:大量
細胞類型:B淋巴細胞
是否是腫瘤細胞:1
物種來源:
細胞形態:淋巴樣

細胞培養步驟

一.培養基培養凍存條件準備:

1) 準備培養基;北美胎牛血清,10%;雙抗1%。

2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液90%血清,10%DMSO,現用。液氮儲存。

二. BC-3細胞ATCC菌種處理

1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,可進行傳代培養。

對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子PBS潤洗細胞1-2。

1. 加2ml消化液0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。

2. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。

3. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。

下面T25瓶為例;

      1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml*培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

      21000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至zui終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。

3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

注意事項:

1.        收到BC-3細胞ATCC菌種后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們。

2.        先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置數小時(4h左右),穩定細胞狀態,切忌在溫箱內靜置過夜。

3.        靜置后鏡檢,拍照,記錄細胞狀態。建議傳代后也拍照記錄細胞生長情況。

4.      貼壁細胞:若細胞密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,收集細胞瓶內的培養基,留8ml繼續培養至80%左右再傳代,瓶蓋可稍微擰松。

5.        細胞瓶內的培養基含血清和雙抗,可收集后4℃保存備用,可補加2%血清。剛開始傳代時建議一半用細胞瓶內的培養基,一半用客戶自備的培養基,使細胞逐漸適應培養條件,以免因不適應而造成生長狀態不佳。

6.        細胞胰酶消化液建議使用PBS配制,

7.        因為細胞培養過程外因太多,所以我們的售后保障期為一周,超過一周的細胞我們會酌情處理,但不提供免費更換服務。

運輸和保存:可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式:(1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮凍存或直接復蘇;(2)存活細胞,收到后應繼續生長,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。

 

 

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